7 de octubre del 2014

Simmons Citrate Agar

Medio utilizado por la diferenciación de enterobacterias en base a la capacitación de usar citrato como única fuente de carbono y energía.

El fosfato monoamónico es la única fuente de nitrógeno y el citrato de sodio es la única fuente de carbono. Ambos componentes son necesarios para el desarrollo bacteriano. Su única fuente de energía es el citrato.

Contiene

v  Citrato de sodio                   2.0

v  Cloruro de sodio                 5.0

v  Fosfato dipotásico              1.0

v  Fosfato monoamónico       1.0

v  Sulfato de magnesio          0.2

PH final= 6.9 ± 0.2

Preparación

Suspender 24.2 del medio deshidratado por litro de agua destilada. Dejar reposar 5 minutos y mezclar calentando a ebullición durante 1 o 2 minutos. Distribuir en tubos y esterilizar en autoclave a 121° C durante 15 minutos.

Su indicador es el Azul de bromotimol. Su siembra es apartir de un cultivo puro de 18-24 hrs, sembrar en superficie un inóculo ligero, usando un asa sin arrastrar el agar. Su incubación es a 35-37° C, durante 24-48 hrs, en aerobiosis.

Limitaciones

Si se usa un inóculo denso para sembrar el medio de cultivo puede variar el color del pico del verde al amarillo-amarronado.

Inoculos muy densos, puede originar resultados falsos positivos.

Cuando se siembra una serie de pruebas bioquímicas a partir del mismo cultivo, se debe esterilizar la aguja de inoculación antes de inocular la prueba del citrato o si no inocularía primero.

      Positivo: crecimiento y color azul en el pico, alcalinidad.

      Negativo: el medio permanece de color verde debido a que no hay desarrollo bacteriano y no hay cambio de color.

Microorganismo	Citrato permeasa	Color del medio
Klebsiellapneumoide	+	Azul
s. typhimurium	-	Azul
E. Coli	-	Verde
S. Flexner	-	Verde

Interpretación del medio citrate simmons

Resultados:

·         Positivo: si el medio de cultivos se torna azul.

·         Negativo: si el medio de cultivo no cambia y mantiene su color verde original